PadoTest® è un'analisi microbiologica di laboratorio per lo studio odontoiatrico. La metodica determina la carica batterica all'interno della tasca parodontale e identifica i sierotipi di Aggregatibacter actinomycetemcomitans (PadoSero). Il referto analitico fornisce allo studio misurazioni quantitative precise.
L'analisi fornisce dati quantitativi sul profilo batterico. Questi valori misurati fungono da base informativa per l'odontoiatra nella definizione del piano di trattamento individuale.
La quantificazione dei batteri marker consente di confrontare la situazione microbica prima e dopo la strumentazione, oltre a supportare la documentazione continua durante la terapia parodontale di supporto (SPT).
Ogni analisi PadoTest® include di serie la rilevazione dei sierotipi di Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa). Il laboratorio fornisce così allo studio dati di differenziazione dettagliati a livello di sub-specie.
Nei decorsi patologici refrattari (resistenti alla terapia), il profilo di laboratorio offre ulteriori elementi utili per l'approfondimento diagnostico delle cause da parte dell'odontoiatra.
La parodontite è una malattia infettiva dell'apparato di sostegno del dente indotta da batteri. PadoTest® misura la presenza di specifici batteri marker. Il referto di laboratorio classifica la quantità batterica rilevata in livelli quantitativi definiti, trasmettendo allo studio lo stato della colonizzazione microbica.
Batteri patogeni parodontali esaminati:
Nomenclatura
Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa)
(precedentemente Actinobacillus actinomycetemcomitans)
Caratteristiche
anaerobio gram-negativo facoltativo, 7 sierotipi con diversa espressione di leucotossina (sierotipo b con elevata incidenza di parodontite aggressiva localizzata)
Patogenicità
Estremamente patogeno
Fattori di virulenza
Leucotossina A
Fattore inibitorio della chemiotassi
Inibizione dei fibroblasti
Tossina del riassorbimento osseo
Collagenesi
Endotossina lipopolisaccaride
Presenza
Per la parodontite localizzata di tipo aggressivo e cronico. I fattori di virulenza favoriscono la colonizzazione e l'insediamento del germe all'interno dello spazio orofaringeo.
Bibliografia
Aberg, C.H., Kelk, P. and Johannsson, A., 2015. Aggregatibacter actinomycetemcomitans: virulence of its leukotoxin and association with aggressive periodontitis. Virulence, 6 (3), 188-195.
Maeda, H., Fujimoto, C., Haruki, Y., Maeda, T., Kokeguchi, S., Petelin, M., Arai, H., Tanimoto, I., Nishimura, F. and Takashiba, S., 2003. Quantitative real-time PCR using TaqMan and SYBR Green for Actinobacillus actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, tetQ gene and total bacteria. FEMMS Immunol Med Microbiol., 39 (1), 81-86.
Malik, R., Changela, R., Krishan, P., Gugnani, S. and Bali, D., 2015. Virulence factors of Aggregatibacter actinomycetemcomitans – A status update. Journal of ICDRO, 7 (2), 137-145.
Nomenclatura
Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) - sierotipi a - f
Caratteristiche
6 sierotipi con diversa espressione di leucotossina (sierotipo b con elevata incidenza di parodontite aggressiva localizzata)
Patogenicità
da non virulento (sierotipo a) ad altamente virulento (sierotipo b con JP2)
Fattori di virulenza
Espressione della leucotossina
Presenza
Per la parodontite localizzata di tipo aggressivo e cronico. I fattori di virulenza favoriscono la colonizzazione e l'insediamento del germe all'interno dello spazio orofaringeo.
Bibliografia
Aberg, C.H., Kelk, P. and Johannsson, A., 2015. Aggregatibacter actinomycetemcomitans: virulence of its leukotoxin and association with aggressive periodontitis. Virulence, 6 (3), 188-195.
Maeda, H., Fujimoto, C., Haruki, Y., Maeda, T., Kokeguchi, S., Petelin, M., Arai, H., Tanimoto, I., Nishimura, F. and Takashiba, S., 2003. Quantitative real-time PCR using TaqMan and SYBR Green for Actinobacillus actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, tetQ gene and total bacteria. FEMMS Immunol Med Microbiol., 39 (1), 81-86.
Malik, R., Changela, R., Krishan, P., Gugnani, S. and Bali, D., 2015. Virulence factors of Aggregatibacter actinomycetemcomitans – A status update. Journal of ICDRO, 7 (2), 137-145.
Nomenclatura
Filifactor alocis (Fa)
Caratteristiche
Anaerobi gram-positivi, estremamente difficili da coltivare
Patogenicità
Estremamente patogeno
Fattori di virulenza
15 diverse proteasi, Microbial Surface Components Recognizing Adhesive Matrix (MSCRAMMs), F. alocis complement inhibitor (FACIN)
Presenza
Si ritrova in campioni subgengivali nella parodontite cronica (CP) e nella parodontite aggressiva generalizzata (gap) ed è associato alla perdita di tessuto di supporto. La Fa è la causa dell'infiammazione cronica e induce la produzione di citochine proinfiammatorie che causano l'apoptosi delle cellule epiteliali gengivali. Rispetto ai rappresentanti Pg, Td, Tf descritti in letteratura come “complessi rossi”, che evidenziano l'associazione maggiore con la patologia parodontale, la Fa ha mostrato la terza più grande prevalenza all'interno di un gruppo di pazienti gap e la seconda più alta prevalenza in un gruppo di pazienti CP. La Fa si trova principalmente nelle regioni del biofilm che provengono dalla parte centrale o persino da quella apicale della borsa (vedi Schlaffer, 2014).
Fa è sempre strettamente intrecciata con altri germi parodontali e intrattiene una relazione simbiotica con Pg, ad esempio, che potrebbe provocare un aumento strutturale a livello del biofilm.
Bibliografia
Aruni, A.W., Roy, F. and Fletcher, H.M., 2011. Filifactor alocis Has Virulence Attributes That can Enhance Ist Persistence under Oxidative Stress Conditions and Mediate Invasion of Epithelial Cells by Porphyromonas gingivalis. Infection and Immunity, 79 (10), 3872-3886.
Aruni, W., Chioma, O. and Fletcher, H.M., 2014. Filifactor alocis: The Newly Discovered Kid on the Block with Special Talents. Journal of Dental Research, 93 (8), 725-732.
Aruni, W., Mishra, A., Dou, Y., Chioma, O., Hamilton, B.N. and Fletcher, H.M., 2015. Filifactor alocis - a new emerging periodontal pathogen. Microbes and Infection, 17 (7), 517-530.
Jusko, M., Miedzak, B., Ermert,D., Magda, M., King, B.C., Bielecka, E., Riesbeck, K., Eick, S., Potempa, J. and Blom, A.M., 2016. FACIN, a Double-Edged Sword oft he Emerging Periodontal Pathogen Filifactor alocis: A Metabolic Enzyme Moonlighting as a Complement Inhibitor. Journal of Immunology, 197, 3245-3259.
Schlafer, S., 2014. Filifactor alocis - der noch unterschätze Parodontitis-Keim in der Zahnfleisch-tasche. Zahnmedizin Report, 9:3.
Nomenclatura
Porphyromonas gingivalis (Pg)
Caratteristiche
Anaerobi stretti gram-negativi
Patogenicità
Estremamente patogeno
Fattori di virulenza
Proteasi associate alla membrana che, ad esempio, scindono il fibrinogeno, provocando un'immorragia durante il sondaggio (BOP), rilasciando emina e ferro e allo stesso tempo come fonte di cibo che causa un'ulteriore moltiplicazione del germe. Lipopolisaccaridi, esopolisaccaridi, proteine della membrana esterna (OMP), collagenasi, tripsina simile alla proteasi, gelatinasi, aminopeptidasi.
Presenza
Il germe non fa parte della "normale" flora orale; le difese immunitarie non sono in grado di controllare completamente un'infezione. Colonizza il parodonto in modo più uniforme di A. actinomycemtemcomitans, che tende a manifestarsi in luoghi individuali.
Bibliografia
How, K.Y., Song, K.P.and Chan, K.G., 2016. Porphyromonas gingivalis: An Overview of Periodontopathic Pathogen below the Gum Line. Frontiers in Microbiology, 7 (53).
Lyons, S.R., Griffen, A.L. and Leys, E.J., 2000. Quantitative Real-Time PCR for Porphyromonas gingivalis and Total Bacteria. Journal of Clinical Microbiology, 38 (6), 2362-2365.
Mysak, J., Podzimek, S., Sommerova, P., Lyuya-Mi, Y., Bartova, J., Janatova, T., Prochazkova, J. and Duskova, Jana, 2014. Porphyromonas gingivalis: Major Periodontopathic Pathogen Overview. Journal of Immunology Research, ID 476068, 8
Nomenclatura
Prevotella intermedia (Pi)
Caratteristiche
Anaerobio obbligato gram-negativo
Patogenicità
Altamente patogeno
Fattori di virulenza
Esopolisaccaridi (EPS)
Cisteina proteasi (Interpain A)
Presenza
Viene rilevato come (co)agente causale di infezioni dentoalveolari, nella maggior parte dei casi miste. Viene anche detto germe marcatore precoce. Attraverso il metabolismo produce lo zucchero residuo nel solco o nella tasca parodontale che si forma. Questo è poi l'ambiente anaerobico necessario che permette l'insediamento dei principali germi parodontali. Pi utilizza ormoni steroidei come fattori di crescita. Dunque potrebbe essere presente più spesso nelle donne in gravidanza.
Bibliografia
Potempa, M., Potempa, J., Kantyka, T., Nguyen, KA., Wawrzonek, K., Manadhar, S.P., Popadiak, K., Riesbeck, K., Eick, S. and Blom, A.M., 2009. Interpain A, a Cysteine Protease from Prevotella intermedia Inhibits Complement by Degrading Complement Factor 3. PLoS Pathogens, 5 (2), e1000316.
Riggio, M.P., Lennon, A. and Roy, K.M., 1998. Detection of Prevotella intermedia in subgingival plaque of adult periodontitis patients by polymerase chain reaction. Journal Periodontal Research, 33 (6), 369-376.
Yamanaka, T., Yamane, K., Furukawa, T., Matsumoto-Mashimo, C., Sigimori, C., Obata, N., Walker, C.B., Leung, K.P. and Fukushima, H., 2011. Comparision oft he virulence of exopolysaccharide- producing Prevotella intermedia to exopolysaccharide non- producing perodontoipathic organism. BMC Infection Disease, 11, 228-237
Nomenclatura
Tannerella forsythia (Tf)
Caratteristiche
Anaerobi stretti gram-negativi
Patogenicità
Estremamente patogeno
Fattori di virulenza
3 enzimi proteolitici: cisteina proteasi (PrtH), carilisina (strutturalmente paragonabile alla matrice umana della metalloproteasi), mirolasi (serina proteasi dipendente dal calcio)
Presenza
Tipica in caso di difetti gravi alle ossa. Nei sacchetti "attivi" in un numero significativamente maggiore rispetto a quello dei sacchetti "inattivi". Presenza rilevata anche nei casi di parodontite ricorrente. Di frequente, in associazione con la parodontite resistente alla terapia. Esiste una stretta relazione tra la concomitante presenza di Treponema denticola e Porphyromonas gingivalis.
Bibliografia
Ksiazek, M., Mizgalska, D., Eick, S., Thorgersen, I.B., Enghild, J.J. and Potempa, J. 2015. KLIKK proteases of Tannerella forsythia: putative virulence factors with a unique domain structure. Frontiers in Microbiology, 6, 312.
Saito, D., Coutinho, L.L., Borges Saito, C.P., Tsai, S.M., Höfling, J.F. and Goncalves, R.B., 2009. Real-time polymerase chain reactionquantification of Porphyromonas gingivalis and Tannerella forsythia in primary endodontic infections. Journal of Endodontics, 35 (11), 1518-1524.
Sharma, A., 2000. Virulence mechansims of Tannerella forsythia. Periodontology, 54 (1), 106-116.
Nomenclatura
Treponema denticola (Td)
Caratteristiche
Spirochete anaerobiche gram-negative corte e strette
Patogenicità
Altamente patogeno
Fattori di virulenza
Proteasi che distruggono i tessuti, ialuronidasi, fosfatasi e fosfolipasi. Stimola la formazione di IL-1 alfa e TNF-alfa.
Presenza
Il fenomeno è associato alla distruzione parodontale (parodontite avanzata), gengivite/parodontite ulcerativa necrotizzante.
Bibliografia
Asai, Y., Jinno, T., Igarashi, H., Ohyama, Y. and Ogawa, T., 2002. Detection and Quantification of Oral Treponemes in Subgingival Plaque by Real-Time PCR. Journal of Clinical Microbiology, 40 (9), 3334-3340.
Dashper, S.G., Seers, C.A., Tan, K.H. and Reynolds, E.C., 2011. Virulence Factors oft he Oral Spirochete Treponema denticola. Journal Dent. Research, 90 (6), 691-703.
Pandit, N., Gugnani, S., Sushil, D. and Bali, D., 2016. Treponema denticola: A teammate in periodontal progression. Journal of ICDRO, 8 (1), 58-62.
Sela, M.N., 2001. Role of Treponema denticola in periodontal diseases. Crit Rev Oral Biol Med, 12 (5), 399-413.
Per la rilevazione e la quantificazione, PadoTest® impiega una specifica Real-Time PCR (reazione a catena della polimerasi). L'elevata precisione di questa metodica analitica fornisce un quadro dettagliato dei batteri marker esaminati all'interno della tasca parodontale. PadoTest® offre un profilo economico vantaggioso e una notevole flessibilità di utilizzo grazie alla possibilità di eseguire test su sito singolo o su siti multipli.
PadoTest® determina la carica batterica; la definizione delle misure terapeutiche compete esclusivamente all'odontoiatra curante!